Androgen receptors and experimental bone loss - an in vivo and in vitro study.

Testosterone is a sex hormone that exhibits many functions beyond reproduction; one such function is the regulation of bone metabolism. The role played by androgen receptors during testosterone-mediated biological processes associated with bone metabolism is largely unknown. This study aims to use a periodontal disease model in vivo in order to assess the involvement of androgen receptors on microbial-induced inflammation and alveolar bone resorption in experimental bone loss. The impact of hormone deprivation was tested through both orchiectomy and chemical blockage of androgen receptor using flutamide (FLU). Additionally, the direct effect of exogenous testosterone, and the role of the androgen receptor, on osteoclastogenesis were investigated. Thirty male adult rats (n=10/group) were subjected to: 1-orchiectomy (OCX); 2-OCX sham surgery; or 3-OCX sham surgery plus FLU, four weeks before the induction of experimental bone loss. Ten OCX sham-operated rats were not subjected to experimental bone loss and served as healthy controls. The rats were euthanized two weeks later, so as to assess bone resorption and the production of inflammatory cytokines in the gingival tissue and serum. In order to study the in vitro impact of testosterone, osteoclasts were differentiated from RAW264.7 cells and testosterone was added at increasing concentrations. Both OCX and FLU increased bone resorption, but OCX alone was observed to increase osteoclast count. IL-1ß production was increased only in the gingival tissue of OCX animals, whereas FLU-treated animals presented a decreased expression of IL-6. Testosterone reduced the osteoclast formation in a dose-dependent manner, and significantly impacted the production of TNF-α; FLU partially reversed these actions. When taken together, our results indicate that testosterone modulates experimental bone loss, and that this action is mediated, at least in part, via the androgen receptor.

The H2S-releasing naproxen derivative, ATB-346, inhibits alveolar bone loss and inflammation in rats with ligature-induced periodontitis.

BACKGROUND: In experimental periodontitis, non-steroidal antiinflammatory drugs (NSAIDs) effectively inhibit the resultant alveolar bone loss. However, their deleterious gastric effects, observed in both animals and humans, dramatically limit their long-term use. It has been proven that the addition of a hydrogen sulfide (H2S)-releasing moiety to classical NSAID structures results in antiinflammatory compounds with improved gastric safeness. In this way, we decided to compare the effects of naproxen with its H2S-releasing derivative ATB-346 on ligature-induced periodontitis in rats. METHODS: Male Holtzman rats had a cotton ligature placed subgingivally around the lower right first molar during 7 days. During this period, groups of animals were daily treated with Na2S (a spontaneous H2S donor) or equimolar oral doses of naproxen (10 mg/kg) or ATB-346 (16 mg/kg). The mandibles were finally collected for histological analysis, radiographical measurements of alveolar bone loss and micro-computed tomography (µCT) analysis. Interleukin (IL)-1ß, IL-6 and IL-10 were quantified in gingiva samples, and the stomachs were also collected for scoring of tissue damage and measurement of myeloperoxidase (MPO, a marker of granulocyte infiltration). RESULTS: Ligature-induced bone loss was significantly inhibited by all the treatments, although only ATB-346 treatment resulted in significant inhibition of bone defect and other histological characteristics (such as flatness of the gingival epithelium, chronic inflammatory cell infiltration and loss of connective tissue in the gingival papillae). Both naproxen and ATB-346 inhibited the increase of gingival IL-1ß and IL-6 secondary to periodontitis, but IL-10 was unaffected. Significant damage and increased MPO contents were only found in the stomachs of the naproxen-treated animals. CONCLUSION: The H2S-releasing moiety in the ATB-346 compound not only does not impair the effects of the parent naproxen on periodontitis, but also improves bone quality and prevents the gastric mucosa damage due to prostaglandin inhibition, thus configuring a potentially new adjuvant therapy for periodontal diseases.

Impacto de drogas antiplaquetárias na doença e no reparo periodontal experimental em ratos / Impact of antiplatelet drugs in experimental periodontal disease and repair in rats

As plaquetas são um reservatório natural de diversos mediadores biológicos e, uma vez ativadas, expressam fatores de crescimento pró e anti-angiogênicos, quimiocinas e monoaminas, modulando a ativação e manutenção dos processos inflamatório e de reparo. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o impacto do tratamento com drogas antiplaquetárias, aspirina (Asp) e clopidogrel (Clop), sobre a doença periodontal e o processo de reparação dos tecidos periodontais após indução de periodontite experimental em ratos. Para a avaliação do processo inflamatório foram realizadas análise microscópica, análise da expressão das quimiocinas CXCL4 e CCL5 por ELISA e da atividade de mieloperoxidase (MPO). Para avaliação do reparo dos tecidos periodontais, foram realizadas análise microscópica, análise da expressão de CXCL12, CXCL4, CCL5 e PDGF por ELISA, contagem de osteoclastos e vasos sanguíneos através de reações de imunohistoquímica e caracterização das células mesenquimais indiferenciadas por imunohistoquímica para CD 271 e imunofluorescência de dupla marcação utilizando CD 271 associado ao CD45, KI67 e TUNEL. Células mesenquimais indiferenciadas derivadas da medula óssea de humanos foram utilizadas in vitro para avaliação da proliferação celular por imunocitofluorescência. Três dias após a instalação da ligadura, verificou-se que o tratamento com as drogas antiplaquetárias abreviou o processo inflamatório, observado através dos aspectos microscópicos, da redução da atividade da enzima mieloperoxidase (p<0.001), e queda da expressão de CXCL4 (p<0.05), entretanto o tratamento com Clop de forma mais acentuada que o da Asp. Após retirada da ligadura, o tratamento com Clop acelerou o processo de reparo através da redução significativa da expressão de CXCL12, CXCL4, PDGF, número de vasos sanguíneos e osteoclastos; por outro lado, o tratamento com Asp apresentou efeitos significativos apenas na redução da expressão de CXCL12 e CXCL4. Por sua vez, tratamento com Clop aumentou o número de osteoblastos, expressão de células mesenquimais indiferenciadas e os índices de proliferação e apoptose dessas células in vivo. In vitro, tratamento com Clop apresentou aumento na taxa de proliferação das células mesenquimais analisadas. Os resultados apontam que tanto a Asp quanto o Clop, apresentam perfil antiinflamatório com repercursão positiva sobre a aceleração do processo de reparo, sendo o Clop mais eficaz em ambos os processos

Platelets are a natural reservoir of several biological mediators and once activated, express growth factors, pro- and anti-angiogenic factors, chemokines and monoamines modulating the activation and maintenance of the inflammatory and repair process. The aim of this study was to evaluate the impact of antiplatelet drugs, aspirin (Asp) and clopidogrel (Clop) on periodontal disease and the repair of periodontal tissues after induction of experimental periodontitis in rats. For the evaluation of the inflammatory process, microscopic evaluation, analysis of the expression of the chemokines CXCL4 and CCL5 by ELISA and myeloperoxidase activity (MPO) were realized. To evaluate periodontal tissue repair we performed microscopic examination, analysis of the expression of CXCL12, CXCL4, CCL5 and PDGF by ELISA, and blood vessels and osteoclast count by immunohistochemistry. Also, characterization of undifferentiated mesenchymal stem cells by immunohistochemical staining for CD 271 (stem cell marker) and immunofluorescence double labeling using CD 271 associated with CD45, Ki67 and TUNEL were realized. Undifferentiated mesenchymal stem cells derived from human bone marrow were used for in vitro evaluation of cell proliferation by immunocitofluorescence. Three days after ligature placement, we found that treatment with antiplatelet drugs abbreviated the inflammatory process observed by the microscopic analysis, reduction of myeloperoxidase activity (p <0.001) and decreased the expression of CXCL4 (p <0.05), but treatment with Clop more pronounced than Asp. After removal of the ligature, Clop treatment accelerated the repair process by significantly reducing the expression of CXCL12, CXCL4, PDGF number of blood vessels and osteoclasts, on the other hand, treatment with Asp only showed significant effects in reducing the expression of CXCL12 and CXCL4. In turn, Clop treatment increased the number of osteoblasts, expression of undifferentiated mesenchymal cells and the proliferation and apoptosis index of these cells in vivo. In vitro treatment with Clop showed an increase in the proliferation rate of undifferentiated mesenchymal cells analyzed. The results showed that both Asp as Clop, exhibit anti-inflammatory profile with positive repercusion on accelerating the repair process, Clop being the most effective in both processes

Conduta de tratamento de gengivite ulcerativa necrosante (GUN) em serviço de urgência / Treatment for necrotizing ulcerative gingivitis(NUG)in an urgency service - a case report

A gengivite ulcerativa necrosante é uma doença periodontal que apresenta curso clínico agudo, de inicio rápido, caracterizada por dor, desconforto e mau hálito do paciente, sendo observadas ulcerações na papila interdental e gengiva marginal. Por este motivo, os pacientes com esta condiçào podem buscar serviços de urgencia odontológica em Unidades de Saude ou Instituicoes de Ensino, cabendo ao cirurgiâo dentista/plantonista adotar a conduta clínica adequada para minimizar a sintomatologia. 0 objetivo deste relato de caso clínico foi expor e discutir alguns aspectos da conduta de tratamento desta enfermidade.

Efeitos de drogas antiplaquetárias na doença periodontal / Effects of antiplatelet drugs in periodontal disease

A associação entre plaquetas, angiogênese e progressão ou reparo da doença periodontal tem sido pouco explorada e, consequentemente, os resultados são inconclusivos. As bactérias patogênicas presentes no sítio periodontal liberam endotoxinas que afetam a integridade endotelial e são capazes de induzir a produção de mediadores químicos derivados de proteínas plasmáticas e da coagulação sanguínea e ao mesmo tempo altera a função plaquetária. Há grande interesse na modulação da atividade das plaquetas nas alterações vasculares, especialmente cardiovasculares. Para isso, drogas antiplaquetárias que são comumente usadas na prevenção da doença tromboembólica, tais como infarto do miocárdio, isquemia cerebral e insuficiência arterial periférica, têm sido utilizadas. A aspirina é o único anti-inflamatório não esteroidal com atividade antiplaquetária. No periodonto, além de reduzir os níveis de citocinas inflamatórias, afeta significativamente o sangramento a sondagem, sugerindo uma modulação dose-dependente da periodontite. Em contrapartida, clopidogrel e ticlopidina são drogas derivadas da tienopiridina, sem ação anti-inflamatória conhecida, sugerindo-se que este benefício esteja relacionado a um efeito anti-inflamatório indireto correlacionado a sua atividade antiplaquetária já estabelecida. Na literatura, são escassas as informações a cerca do efeito destas drogas sobre o periodonto e desenvolvimento da doença periodontal. O uso de drogas antiplaquetárias hipoteticamente pode alterar a patogênese da periodontite e consequente reparação dos tecidos periodontais através do bloqueio da secreção de mediadores químicos que, de modo geral, são importantes na modulação do processo inflamatório e de reparo tecidual.

Influência de drogas antiplaquetárias na reparação da doença periodontal experimental em ratos / Influence of antiplatelet drugs in experimental periodontal healing in rats

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da administracão da aspirina (Asp), do clopidogrel (Clo) e da ticlopidina (Tic) sobre o processo de reparacão dos tecidos periodontais apos inducão experimental de periodontite em ratos. Primeiramente avaliou-se a acão destas drogas sobre a expressao das citocinas pro-inflamatórias: TNF-α, IL-6 e TXA2 no tecido gengival de 25 ratos subdivididos em 5 grupos (n=5), 15 dias após a instalacão da ligadura ao redor do primeiro molar inferior. Para avaliacão do reparo dos tecidos periodontais, setenta e dois ratos (Rattus norvegicus albinus, Holtzman) foram distribuídos aleatoriamente em 6 grupos (n=12), sendo 1 controle e 5 submetidos a periodontite através da instalacão de ligadura bilateral na região de primeiro molar inferior. Após 15 dias, o grupo controle e um grupo com periodontite foram sacrificados. Para a inducão do reparo dos tecidos periodontais, as ligaduras dos animais dos outros 4 grupos foram removidas e os ratos foram tratados com solucão de NaCl 0.9%, Asp (30mg/kg), Clo (75 mg/kg) e Tic (300 mg/kg), diariamente, via gavagem. Após 15 dias de tratamento, os animais foram sacrificados, as hemi- mandibulas do lado direito removidas para análise histológica e as do lado esquerdo para avaliação macroscópica, microtomografia computadorizada e análise da expressão, atividade específica e co-localização das metaloproteinases de matriz (MMPs) -2 e -9 através de zimograma e zimografia in situ. Após a retirada da ligadura, houve reparação do osso alveolar e reparação do tecido gengival representado pela recomposição da arquitetura tecidual do epitélio e do tecido conjuntivo. O tratamento com Asp comprometeu a reparação óssea alveolar na face mesial e acelerou na área de furca, ao passo que não influenciou na recomposição da arquitetura do tecido epitelial e conjuntivo. O tratamento com Tic comprometeu o reparo do osso alveolar na face mesial e área de furca, assim como a reparação do tecido epiteal gengival. O Clo não influenciou na evolução da reparação tecidual. Os parâmetros estereométricos avaliados mostraram que a qualidade do tecido ósseo neoformado não sofreu alterações quando os ratos foram tratados com uma das drogas antiplaquetárias. No processo de reparo ocorreu diminuição da expressão das MMPs avaliadas, que não foi influenciada pelo tratamento com as drogas antiplaquetárias, assim como a co-localização manteve-se inalterada ente os grupos experimentais. Estes resultados sugerem que as drogas antiplaquetárias nas dosagens utilizadas abreviaram o processo inflamatório e aceleraram a reparação do tecido conjuntivo gengival. Entretanto, o tratamento com Tic induziu desorganização e desestruturação do epitélio gengival, assim como, semelhante à Asp retardou parte ou totalmente o reparo do tecido ósseo alveolar após indução de periodontite experimental, porém este retardo não provocou alterações na qualidade do tecido ósseo neoformado

The aim of this study was to evaluate the effect of administration of aspirin (Asp), clopidogrel (Clo) and ticlopidine (Tic) in the process of periodontal tissue repair after induction of experimental periodontitis in rats. First, we evaluated the action of these drugs on the expression of pro-inflammatory cytokines: TNF-α, IL-6 and TXA2 in the gingival tissue of 25 rats randomly distributed in five equal groups (n=5), 15 days after ligature placement around lower first molars. For periodontal tissue evaluation, seventy-two rats (Rattus norvegicus albinus, Holtzman) were randomly distributed in 6 equal groups (n=12). One control and 5 submitted to a ligature-induced periodontitis model in the region of lower first molar bilaterally. After 15 days, the control group and a group with periodontitis were sacrificed. To induce periodontal tissue repair, ligatures from the other 4 groups were removed and the rats treated with NaCl 0.9%, Asp (30 mg/kg), Clo (75 mg/kg) and Tic (300 mg/kg) daily by gavage. After 15 days of treatment, animals were killed, the right mandibles were removed for histological analysis and the left side to macroscopic, microtomography evaluation and expression, activity and colocalization of matrix metalloproteinases (MMPs) -2 and -9 by zymogram and in situ zymography. After removal of the ligature, there was repair of the alveolar bone and gingival tissue represented by the restoration of tissue architecture of the epithelium and connective tissue. Treatment with Asp undertook the repair of the mesial alveolar bone and accelerated the repair of furcation area, while not influenced the restoration of tissue architecture and epithelial tissue. Treatment with Tic undertook the repair of mesial alveolar bone and furcation the area, as well as the repair of gingival epithelial tissue. Clo did not influence the evolution of tissue repair. However, the stereometric parameters evaluated showed that the quality of newly formed bone tissue did not change when the animals were treated with an antiplatelet drug. In the process of repair, the expression of MMPs was decreased, and was not affected by treatment with antiplatelet drugs, co-localization remained unchanged between the experimental groups. These results suggest that antiplatelet drugs at the dosages used abbreviated the inflammatory process and accelerated the connective tissue repair. However, treatment with Tic induced disorganization and disintegration of gingival epithelial tissue and, as well as treatment with Asp delayed part or fully the repair of alveolar bone tissue after induction of experimental periodontitis, but this delay does not affected the quality of newly formed bone tissue

Prevalence of oral mucosa lesions in diabetic patients: a preliminary study.

AIM: The present study aimed to evaluate the prevalence of superficial lesions in the oral cavity mucosa in diabetic patients. METHODS: The sample was made of 30 patients. To obtain these results we did rigorous clinical and complementary tests. RESULTS: Of the 30 patients, 9 (30%) were males and 21 (70%) females. Of the studied patients, 40% were below 60 years of age, and 60% were older than 60 years. Thirteen different types of mucosal alterations were diagnosed. Tongue varicose veins (36.6%) and candidiasis (27.02%) were the most prevalent. Such alterations can be associated with the fact that these conditions are commonly found in senile patients and are also associated with prolonged wear of dentures. Xerostomia was diagnosed in only 1 (3.33%) patient, disagreeing with most of the studies observed in the literature. CONCLUSION: Most of the diabetic patients presented at least one type of oral mucosa lesion or alteration.

Prevalência das alterações da mucosa bucal em pacientes diabéticos: estudo preliminar / Prevalence of oral mucosa lesions in diabetic patients: a preliminary study

OBJETIVO: O objetivo do presente estudo foi o de verificar a prevalência das lesões superficiais da mucosa da cavidade bucal em pacientes diabéticos. MÉTODOS: A amostra foi constituída de 30 pacientes. Para a obtenção dos resultados foram realizados exames clínicos criteriosos e exames complementares quando necessário. RESULTADOS: Dos 30 indivíduos, 9 (30 por cento) eram do sexo masculino e 21 (70 por cento), do sexo feminino. Dos pacientes estudados, 40 por cento tinham idade até 60 anos e 60 por cento possuíam idade superior. Foram diagnosticados 13 diferentes tipos de alterações da mucosa em diversas regiões, sendo a varicosidade lingual (36,6 por cento) e a candidíase (27,02 por cento) as mais prevalentes. Tais alterações podem estar relacionadas ao fato de serem achados semiológicos comuns em pacientes senis e também ao uso prolongado de próteses. A xerostomia foi diagnosticada em apenas 1 (3,33 por cento) paciente divergindo da maioria dos estudos observados na literatura. CONCLUSÃO: A maioria dos pacientes diabéticos apresentou pelo menos um tipo de lesão da mucosa bucal.

AIM: The present study aimed to evaluate the prevalence of superficial lesions in the oral cavity mucosa in diabetic patients. METHODS: The sample was made of 30 patients. To obtain these results we did rigorous clinical and complementary tests. RESULTS: Of the 30 patients, 9 (30 percent) were males and 21 (70 percent) females. Of the studied patients, 40 percent were below 60 years of age, and 60 percent were older than 60 years. Thirteen different types of mucosal alterations were diagnosed. Tongue varicose veins (36.6 percent) and candidiasis (27.02 percent) were the most prevalent. Such alterations can be associated with the fact that these conditions are commonly found in senile patients and are also associated with prolonged wear of dentures. Xerostomia was diagnosed in only 1 (3.33 percent) patient, disagreeing with most of the studies observed in the literature. CONCLUSION: Most of the diabetic patients presented at least one type of oral mucosa lesion or alteration.